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熔蠟儀在組織脫水浸蠟實(shí)驗(yàn)中的使用方法

點(diǎn)擊次數(shù):4030 更新時(shí)間:2018-03-14

熔蠟儀在組織脫水浸蠟實(shí)驗(yàn)中的使用方法

 

    組織經(jīng)過透明劑的*透明后,被移放于使用熔蠟儀熔化后的65左右的石蠟中,于65的電熱恒溫箱中浸漬的過程稱為浸蠟。組織在脫水時(shí),組織中的脂類和類脂等物質(zhì)在脫水劑的作用下被溶解掉,留下了許多腔隙,許多管腔組織和血管,也有許多腔隙,這些都嚴(yán)重地影響了切片。組織浸蠟時(shí),由于誘導(dǎo)劑(二甲苯)的作用,石蠟進(jìn)入到組織的各個(gè)角落,并在各個(gè)角落中保存下來。當(dāng)石蠟包埋后冷卻時(shí),這浸入到里面的石蠟便可起到支撐的作用,而且使組織不致于變形,塌陷等現(xiàn)象,使切片能完整的切出,便于鏡下觀察。

 

    由于生物樣品各種組織成分不同,因此性質(zhì)也各異,如軟硬程度,疏松、致密程度,面積大小等都不相同,自然狀態(tài)下要將它們切成十幾微米甚至幾個(gè)微米的薄片,幾乎是辦不到的。包埋(embedding)就是將某些特殊的支持物質(zhì)浸入到組織塊內(nèi)部,利用支持物質(zhì)的物理特性,如由液態(tài)轉(zhuǎn)變成固態(tài),使整個(gè)組織具有均勻一致的固態(tài)結(jié)構(gòu)和足夠的硬度,以利于用切片機(jī)制取極薄的切片。利用石蠟(paraffin)作為包埋劑,將浸過蠟的組織塊置于石蠟內(nèi)制成蠟塊,是組織學(xué)切片技術(shù)中zui常用的一種包埋方法。

 

    使用常規(guī)技術(shù)制作切片或超薄切片時(shí),由于組織是柔軟的,或局部的軟硬不均,這樣制作厚薄均勻的切片是困難的。所以有必要用一定物質(zhì)浸透組織內(nèi)部,整個(gè)組織一樣硬化,先將熔化的石蠟注入包埋托內(nèi)(模具),而后用鑷子將經(jīng)過浸蠟的組織塊從脫水盒中取出,放入包埋托中央,放在小冷臺上,用鑷子輕按組織塊,以達(dá)到組織塊平整,蓋上脫水盒底,再加好石蠟,移至冷凍臺上,待冷凍好后,卸下組織蠟塊待切。

    熔化石蠟時(shí)使用熔蠟儀操作更加方便,在熔蠟儀桶內(nèi)放置蠟塊前應(yīng)先關(guān)閉電源,固態(tài)蠟塊要切成小塊后放入,建議切成<50×50×50mm塊狀,過大的蠟塊會損壞桶內(nèi)的保護(hù)網(wǎng)罩。根據(jù)放入石蠟的軟硬,設(shè)定恰當(dāng)?shù)臏囟龋?/span>石蠟有軟蠟和硬蠟之分,軟蠟的熔點(diǎn)有45、52~54。硬蠟的熔有56~58,58~6060~62。使用過程中應(yīng)隨時(shí)觀察,當(dāng)桶內(nèi)的蠟液低過桶體的1/3時(shí),要及時(shí)加蠟。加熱使用時(shí)溫度波動(dòng)會比較大,這屬正?,F(xiàn)象,當(dāng)一段時(shí)間溫度恒定后即可正常使用。英格爾熔蠟儀在運(yùn)行過程中應(yīng)不定時(shí)的進(jìn)行攪拌,可以提高精度均勻性。

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